目前的研究认为,慢性乙肝病毒感染之所以能够持续存在,主要是因为缺乏有效的针对稳定HBV共价闭合环状DNA(cccDNA)微染色体的新型治疗方法。法国里昂癌症研究中心(Cancer Research Center of Lyon,CRCL)研究人员进行了一项采用CRISPR/Cas9方法来靶向HBV基因组的研究,并研究了CRISPR/Cas9基因编辑后cccDNA的走向。研究人员首先在表达HBV受体钠离子牛磺胆酸共转运多肽(NTCP)的HepG2细胞中建立了一种核糖核蛋白(RNP)递送系统。其次,在建立感染后将核糖核蛋白(RNP)复合体进行递送,旨在确保cccDNA的靶向性。最后,在进行CRISPR/Cas9基因编辑后研究人员对细胞内外HBV参数进行分析。使用Southern印迹分析确定 cccDNA的表达,使用RNA测序以确定突变的cccDNA是否具有转录活性。...
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